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有關干粉培養(yǎng)基煮沸滅菌的方式及步驟都在這里
點擊次數(shù):1549 發(fā)布時間:2021-08-27
干粉培養(yǎng)基在使用之前必須進行滅菌處理,將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。
其中,濕熱滅菌法又包括四種方式:煮沸法、流動蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來說,使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。
但是對于有些培養(yǎng)基來說,高壓條件會損壞培養(yǎng)基中的某些成分,不利于培養(yǎng)基的使用,所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。本文主要就煮沸滅菌方法進行討論。
有關煮沸滅菌的描述,通常有如下幾種方式:
a、稱取本品41. 5g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,煮沸不要超過2分鐘。無需高壓滅菌。臨用時制備,不得超過3小時。
b、稱取本品50. 3g,加入1000mL蒸餾水中,加熱煮沸至*溶解,冷至45-50℃, 搖勻,傾入無菌平皿備用。無需高壓滅菌。
c、稱取本品89g,煮沸溶解于1000mL蒸餾水中,冷至45-50℃時,傾入無菌平皿,備用。注:無需高壓滅菌。
d、稱取本品57g,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時,傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2h,然后蓋上,備用。無需高壓滅菌。在24小時內使用。
這些方法描述中,都特別強調“無需高壓滅菌”、“不要過分熱”、“煮沸充分溶解”,那么究竟該怎樣操作,才能達到既滅菌*又盡量降低對培養(yǎng)基的破壞呢?
煮沸滅菌的實際操作
1、關于煮沸方式,有人提出可以隔水煮沸,但經(jīng)過反復試驗,發(fā)現(xiàn)這種煮沸方式存在兩大弊端:①溫度不夠,達不到滅菌效果;②經(jīng)隔水煮沸的含瓊脂培養(yǎng)基,在水浴的過程中易出現(xiàn)分層現(xiàn)象。
2、為了對培養(yǎng)基進行有效煮沸滅菌,根據(jù)我們實踐摸索,建議如下操作:
①準備好電磁爐和搪瓷缸(不要用鐵質容器) ;
?、趯⑴囵B(yǎng)基按比例加水,稱量至搪瓷缸中,用玻璃棒不斷攪拌,直至*溶解、無明顯團狀物或顆粒;
③將搪瓷缸置于電磁爐上,大火燒開,期間持續(xù)攪拌,避免糊底;當液面*沸騰后,立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開,算是一次煮沸操作;液面回落后,立即放回電磁爐,重復上面的步驟;總共煮沸3次即可。
?、軐⒅蠛玫呐囵B(yǎng)基冷卻至需要的溫度,進行傾注平皿等操作。